detinfДЕТСКИЕ ИНФЕКЦИИCHILDREN INFECTIONS2072-81072618-8139Association of Pediatricians and Infection Disease doctors10.22627/2072-8107-2017-16-4-5-9detinf-318Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ЛИКВОРА ПРИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ГНОЙНЫХ МЕНИНГИТАХ У ДЕТЕЙEXPERIMENTAL STUDY OF IMMUNOMODULATORY FEATURES OF CEREBROSPINAL FLUID IN CASE OF BACTERIAL PURULENT MENINGITIS IN CHILDRENАлексееваЛ. А.AlekseevaL. A.

дбн, ведущий научный сотрудник

отдел клинической лабораторной диагностики

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9, +7(812) 234-34-18

Head of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics

Saint Petersburg, +7(812) 234-34-18

kldidi@mail.ruСкрипченкоН. В.SkripchenkoN. V.

д.м.н. профессор, заместитель директора по научной работе,

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9

заведующая кафедрой

кафедра инфекционных заболеваний у детей ФП и ДПО

+7 (812) 234-10-38

MD, professor, deputy director for scientific work

Saint Petersburg, +7 (812) 234-10-38

snv@niidi.ruЖелезниковаГ. Ф.ZheleznikovaG. F.

д.м.н., профессор, старший научный сотрудник

отдел клинической лабораторной диагностики

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9, +7(812) 234-90-06 

MD, Senior Researcher, Department of Clinical Laboratory Diagnostic

zheleznikova.galina@gmail.comМонаховаН. Е.MonakhovaN. E.

научный сотрудник

отдел клинической лабораторной диагностики

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9, +7(812) 234-90-06, 

Researcher of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics

Saint Petersburg, +7(812) 234-90-06

immidi@yandex.ruЖирковА. А.ZhirkovA. A.

младший научный сотрудник

отдел клинической лабораторной диагностики

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9, +7(812) 234-90-06

Junior Researcher of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics,

ant-zhirkov@yandex.ruБессоноваТ. В.BessonovaT. V.

научный сотрудник

отдел клинической лабораторной диагностики,

197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, д. 9, +7(812) 234-34-18

Researcher of the Department of Clinical Laboratory Diagnostics,

bioximiya@mail.ruДетский научно-клинический центр инфекционных болезней ФМБАPediatric Research and Clinical Center of Infectious DiseasesДетский научно-клинический центр инфекционных болезней ФМБА; СПбГПМУ Минздрава РоссииPediatric Research and Clinical Center of Infectious Diseases,Детский научно-клинический центр инфекционных болезней ФМБА,Pediatric Research and Clinical Center of Infectious DiseasesДетский научно-клинический центр инфекционных болезней ФМБАPediatric Research and Clinical Center of Infectious Diseases,20170712201716459Copyright © Алексеева Л.А., Скрипченко Н.В., Железникова Г.Ф., Монахова Н.Е., Жирков А.А., Бессонова Т.В., 20172017Алексеева Л.А., Скрипченко Н.В., Железникова Г.Ф., Монахова Н.Е., Жирков А.А., Бессонова Т.В.Alekseeva L.A., Skripchenko N.V., Zheleznikova G.F., Monakhova N.E., Zhirkov A.A., Bessonova T.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://detinf.elpub.ru/jour/article/view/318

Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства, Санкт-Петербург, Россия Изучение роли компонентов ликвора в процессах пато- и саногенеза заболеваний центральной нервной системы является фундаментальной проблемой медицины и биологии. Цель работы — в эксперименте in vitro изучить иммуномодулирующие свойства ликвора при бактериальных гнойных менингитах у детей.

В ФГА-стимулированной реакции бласттрансформации лейкоцитов исследованы иммуномодулирующие свойства высокомолекулярной и низкомолекулярной фракций ликвора 33 детей с бактериальным гнойным менингитом (БГМ) разной этиологии и 12 детей без менингита. Исследовано влияние образцов цельного ликвора 8 детей с БГМ на выработку иммунорегуляторных цитокинов клетками крови. Концентрацию цитокинов (ИЛ-12, ФНО-a, IL-8, IL-6, IL-10, ИЛ-1b) в надосадках 3-х дневной культуры клеток крови определяли методом проточной цитометрии.

В тесте ФГА-РБТЛ выявлены эффекты фракций ликвора, направленные как на стимуляцию, так и на супрессию бластообразования. Максимальная частота стимулирующего эффекта фракций выявлена у детей с менингококковым менингитом. Установлена связь динамики образования бластных форм под воздействием фракций ликвора с тяжестью течения заболевания. Исследованные образцы ликвора детей с БГМ максимально стимулировали выработку клетками крови провоспалительного цитокина ИЛ-6, тогда как на синтез других иммунорегуляторных цитокинов воздействие было неоднозначным. 

Pediatric Research and Clinical Center of Infectious Diseases under the Federal Medical Biological Agency, Saint Petersburg, Russia Investigation of the role of cerebrospinal fluid components in the processes of patho- and sanogenesis of central nervous system diseases is a fundamental problem of medicine and biology. The work aim was to study immunomodulatory features of cerebrospinal fluid in case of bacterial purulent meningitis (BPM) in children by an in vitro experiment.

There were studied immunomodulatory features of high-molecular and low-molecular fractions of cerebrospinal fluid of 33 children with bacterial purulent meningitis of different etiology and 12 children without meningitis by phytohemagglutinin (PHA)-stimulated reaction of leukocyte blast transformation. There was studied the influence of homogeneous cerebrospinal fluid samples of 8 children with bacterial purulent meningitis upon the production of immunoregulatory cytokines by blood cells. Concentration of cytokines (Interleukin (IL)-12, Tumor necrosis factor (TNF)-a, IL-8, IL-6, IL-10, IL-1b) in supernatants of 3-day old cultures of blood cells was detected by flow cytometry method.

The effects of cerebrospinal fluid fractions directed on both stimulation and suppression of blast production were identified by phytohemagglutinin-stimulated reaction of leukocyte blast transformation (PHA-RLBT) test. The maximal frequency of stimulating effect of fractions was revealed in children with meningococcal meningitis. There was detected a link between the dynamics of blast forms production under the influence of cerebrospinal fluid fractions and severity of the disease course. The studied cerebrospinal fluid samples of children with bacterial purulent meningitis stimulated IL-6 proinflammatory cytokine production by blood cells as much as possible whereas the influence upon the synthesis of other immunoregulatory cytokines was ambiguous.

ликворбактериальный гнойный менингиткультура клеток кровиФГА-РБТЛцитокиныдетиcerebrospinal fluidbacterial purulent meningitisblood cell culturephytohemagglutinin-stimulated reaction of leukocyte blast transformation (PHA-RLBT)cytokineschildrenReferencesСкрипченко Н.В., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф. Ликвор и его клиническое значение при инфекционных заболеваниях нервной системы. Журнал Педиатр. 2011, 3(3):21—32. [Skripchenko N.V., Alekseeva L.A., Zheleznikova G.F. Сerebrospinal fluid and its clinical significance in infectious diseases of the nervous system. Zhurnal Pediatr. 2011, 3(3):21—32. (In Russ)]Скрипченко Н.В., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф. Ликвор и его клиническое значение при инфекционных заболеваниях нервной системы. Журнал Педиатр. 2011, 3(3):21—32. [Skripchenko N.V., Alekseeva L.A., Zheleznikova G.F. Сerebrospinal fluid and its clinical significance in infectious diseases of the nervous system. Zhurnal Pediatr. 2011, 3(3):21—32. (In Russ)]Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Алексеева Л.А. Иммунные факторы в цереброспинальной жидкости при бактериальных, грибковых или паразитарных нейроинфекциях. Клиническая лабораторная диагностика. 2012, 11: 43—47. [Zheleznikova G.F., Skripchenko N.V., Alekseeva L.A. Immune factors in cerebrospinal fluid in bacterial, fungal or parasitic neuroinfections. Klinicheskaja Laboratornaja Diagnostika. 2012, 11: 43— 47. (In Russ)]Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Алексеева Л.А. Иммунные факторы в цереброспинальной жидкости при бактериальных, грибковых или паразитарных нейроинфекциях. Клиническая лабораторная диагностика. 2012, 11: 43—47. [Zheleznikova G.F., Skripchenko N.V., Alekseeva L.A. Immune factors in cerebrospinal fluid in bacterial, fungal or parasitic neuroinfections. Klinicheskaja Laboratornaja Diagnostika. 2012, 11: 43— 47. (In Russ)]Zajkowska J., Grygorczuk S., Pryszmont J. Concentration of interleukin 6 and 10 in tick-borne and purulend encephalomeningitis. Pol. Merk. Lekarski. 2006; 21(121):29—34.Zajkowska J., Grygorczuk S., Pryszmont J. Concentration of interleukin 6 and 10 in tick-borne and purulend encephalomeningitis. Pol. Merk. Lekarski. 2006; 21(121):29—34.Фомин В.В., Сабитов А.У., Хаманова Ю.Б. Состояние цитокиновой системы при нейроинфекциях у детей. Инфекционные болезни. 2010; 8(2):342. [Fomin V.V., Sabitov А.U., Khamanova U.B. State of cytokine systems at neuroinfections in children. Infektsionnye Bolezni=Infectious Diseases. 2010; 8(2):342. (In Russ.)].Фомин В.В., Сабитов А.У., Хаманова Ю.Б. Состояние цитокиновой системы при нейроинфекциях у детей. Инфекционные болезни. 2010; 8(2):342. [Fomin V.V., Sabitov А.U., Khamanova U.B. State of cytokine systems at neuroinfections in children. Infektsionnye Bolezni=Infectious Diseases. 2010; 8(2):342. (In Russ.)].Малашхия Ю.А., Сепиашвили Р.И., Надареишвили З.Г., Малашхия Н.Ю. Проблемы неврологической и иммунологической памяти и перспективы реабилитации (основы и концепция). Аллергология и иммунология. 2015,16(1): 19—24. [Malashhija Ju.A., Sepiashvili R.I., Nadareishvili Z.G., Malashhija N.Ju. The problems of neurological and immunological memory and the prospects for rehabilitation (foundations and concept). Allergologija i Immunologija. 2015,16(1): 19—24. (In Russ)]Малашхия Ю.А., Сепиашвили Р.И., Надареишвили З.Г., Малашхия Н.Ю. Проблемы неврологической и иммунологической памяти и перспективы реабилитации (основы и концепция). Аллергология и иммунология. 2015,16(1): 19—24. [Malashhija Ju.A., Sepiashvili R.I., Nadareishvili Z.G., Malashhija N.Ju. The problems of neurological and immunological memory and the prospects for rehabilitation (foundations and concept). Allergologija i Immunologija. 2015,16(1): 19—24. (In Russ)]Корнева Е.А., Перекрест С.В. Взаимодействие нервной и иммунной систем в норме и патологии. Медицинский академический журнал. 2013, 13(3): 7—17. [Korneva E.A., Perekrest S.V. Interaction of the nervous and immune systems in norm and pathology. Medicinskij Akademicheskij Zhurnal. 2013, 13(3): 7—17. (In Russ)]Корнева Е.А., Перекрест С.В. Взаимодействие нервной и иммунной систем в норме и патологии. Медицинский академический журнал. 2013, 13(3): 7—17. [Korneva E.A., Perekrest S.V. Interaction of the nervous and immune systems in norm and pathology. Medicinskij Akademicheskij Zhurnal. 2013, 13(3): 7—17. (In Russ)]Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины: монография. СПб.: Фолиант, 2008: 552. [Ketlinskiy S.A., Simbirtsev A.S. Cytokinesa. SPb.: Foliant, 2008: 552. (In Russ)]Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины: монография. СПб.: Фолиант, 2008: 552. [Ketlinskiy S.A., Simbirtsev A.S. Cytokinesa. SPb.: Foliant, 2008: 552. (In Russ)]Lehnardt S. Innate immunity and neuroinflammation in the CNS: the role of microglia in Toll-like receptor-mediated neuronal injury. Glia. 2010. 58(3): 253—63.Lehnardt S. Innate immunity and neuroinflammation in the CNS: the role of microglia in Toll-like receptor-mediated neuronal injury. Glia. 2010. 58(3): 253—63.Engelhardt B., Vajkoczy P., Weller R.O. The movers and shapers in immune privilege of the CNS. Nat Immunol. 2017. 18(2): 123— 131.Engelhardt B., Vajkoczy P., Weller R.O. The movers and shapers in immune privilege of the CNS. Nat Immunol. 2017. 18(2): 123— 131.Lotti T., D'Erme A.M., Hercogova J. The role of neuropeptides in the control of regional immunity. Clin Dermatol. 2014. 32(5): 633— 45.Lotti T., D'Erme A.M., Hercogova J. The role of neuropeptides in the control of regional immunity. Clin Dermatol. 2014. 32(5): 633— 45.Молочный В.П., Е.С. Новик, Г.Г . Обухова. Цитокиновый статус ликвора у детей с менингококковым и энтеровирусным менингитами. Детские инфекции. 2007; 2:10—12. [Molochny V.P., E.S. Novik, G.G. Obukhov. Cytokine status of cerebrospinal fluid in children with meningococcal and enterovirus meningitis. Detskie Infektsii=Children's Infections. 2007; 2:10—12. (In Russ)]Молочный В.П., Е.С. Новик, Г.Г . Обухова. Цитокиновый статус ликвора у детей с менингококковым и энтеровирусным менингитами. Детские инфекции. 2007; 2:10—12. [Molochny V.P., E.S. Novik, G.G. Obukhov. Cytokine status of cerebrospinal fluid in children with meningococcal and enterovirus meningitis. Detskie Infektsii=Children's Infections. 2007; 2:10—12. (In Russ)]Сорокина М.Н. Диагностика неврологических осложнений и неотложная терапия бактериальных нейроинфекций у детей: Автореф. дис. … дмн. СПб.,1992: 48. [Sorokina M.N. Diagnosis of neurological complications and emergency therapy of bacterial neuroinfections in children: Abstract of MD Thesis (Medicine). SPb.,1992: 48. (In Russ)]Сорокина М.Н. Диагностика неврологических осложнений и неотложная терапия бактериальных нейроинфекций у детей: Автореф. дис. … дмн. СПб.,1992: 48. [Sorokina M.N. Diagnosis of neurological complications and emergency therapy of bacterial neuroinfections in children: Abstract of MD Thesis (Medicine). SPb.,1992: 48. (In Russ)]Сорокина М.Н., Алексеева Л.А., Аксенов О.А., Железникова Г. Ф. Молекулярные механизмы терапевтического действия ликворотрансфузии при экспериментальном пневмококковом менигоэнцефалите: Сборник научных работ, ч.1 «Бактериально-вирусные инфекции (патоморфология, патогенез, клиника, лечение)». Саратовский медицинский институт, 1993: 81—84. [Sorokina M.N., Alekseeva L.A., Aksenov O.A., Zheleznikova G.F. Molecular mechanisms of the therapeutic action of liquorotransfusion in experimental pneumococcal meningoencephalitis. Р.1 «Bacterial viral infections (pathomorphology, pathogenesis, clinic, treatment)». Saratov Medical Institute. 1993: 81—84. (In Russ)]Сорокина М.Н., Алексеева Л.А., Аксенов О.А., Железникова Г. Ф. Молекулярные механизмы терапевтического действия ликворотрансфузии при экспериментальном пневмококковом менигоэнцефалите: Сборник научных работ, ч.1 «Бактериально-вирусные инфекции (патоморфология, патогенез, клиника, лечение)». Саратовский медицинский институт, 1993: 81—84. [Sorokina M.N., Alekseeva L.A., Aksenov O.A., Zheleznikova G.F. Molecular mechanisms of the therapeutic action of liquorotransfusion in experimental pneumococcal meningoencephalitis. Р.1 «Bacterial viral infections (pathomorphology, pathogenesis, clinic, treatment)». Saratov Medical Institute. 1993: 81—84. (In Russ)]

The authors declare that there are no conflicts of interest present.